CHƯƠNG 5. SỰ DUNG HỢP IgMFc VỚI PROTEIN HA GIÚP TĂNG CƯỜNG KHẢ NĂNG BẢO HỘ TRÊN GÀ
GIỚI THIỆU
Chương 3 và Chương 4 đã trình bày các nghiên cứu và kết quả thu được đã chứng minh rằng việc dung hợp ELP vào HA trimer không ảnh hưởng đến hoạt tính sinh miễn dịch của kháng nguyên HA, tiếp đến dạng HA oligomer có khả năng kích thích sản sinh đáp ứng miễn dịch tốt hơn dạng HA trimer. Kế thừa những kết quả được trình bày ở Chương 3 và Chương 4, chúng tôi mong muốn tạo ra dạng HA oligomer dung hợp ELP với mục đích tăng cường khả năng biểu hiện, dễ dàng tinh sạch đồng thời tăng cường tính sinh miễn dịch của kháng nguyên tái tổ hợp.
IgM là một ứng cử viên tiềm năng trong việc dung hợp với protein, đặc biệt là phát triển vaccine vì kháng thể này tạo thành các polymer tự nhiên liên kết với C1q và TRIM2, tham gia vào chuyển đổi phân lớp kháng thể, định hình phản ứng miễn dịch tiếp theo và đã được chứng minh là chất bổ trợ tự nhiên tốt nhất trong vaccine. Hơn nữa, IgM có thêm một lợi thế đó là có thể gắn với các thụ thể đặc biệt trên tế bào lympho B, T (CD4þ/CD8þ) và NK, kích thích được phản ứng “nhớ” mà một vaccine hiệu quả yêu cầu) (Czajkowsky et al., 2012). Vùng Fc của IgM được đặc biệt quan tâm vì cấu trúc và sự oligomer hóa không giống với các vùng Fc của Ig khác. Phần Fc của IgM bao gồm ba miền Ig: Cμ2 (C337), Cμ3 (C414) và Cμ4 và một đoạn đuôi bổ sung ở đầu C (tp) (C575). Phần Fc của IgM được liên kết cộng hóa trị trong các miền Cμ2, Cμ3 và Cμ4 (tp) bằng các cầu nối disulfua giữa các chuỗi (Müller et al., 2013).
Các HA được gắn đuôi Fc là những ứng cử viên tiềm năng cho các phương pháp tiếp cận từ gen sang vaccine nhằm tạo vaccine tiêm phòng cúm. Gần đây, vùng Fc của immunoglobulin ở người đã được dung hợp với hemagglutinin (HA) của virus cúm H1 và H3 ở người và virus cúm H5 ở gia cầm để sản xuất dưới dạng protein dung hợp tái tổ hợp từ các tế bào côn trùng nhiễm baculovirus (Loureiro et al., 2011). Các protein tái tổ hợp HA-human immunoglobulin Fc domain (HA-HuFc) được chứng minh có khả năng glycosyl hóa có khối lượng phân tử mong muốn và có khả năng gây ngưng kết các tế bào hồng cầu, các protein này được tinh sạch dựa trên cột protein A và được sử dụng để tạo đáp ứng miễn dịch cho chuột khi không có sự xuất hiện của chất bổ trợ. Khả năng sinh miễn dịch đã được chứng minh cho tất cả các phân nhóm, với các mẫu huyết thanh cho thấy khả năng ức chế ngưng kết tế bào hồng cầu đặc hiệu ở phân nhóm, tính đặc hiệu của các epitope tương tự như được trông thấy ở cả gây nhiễm virus và phản ứng trung hòa (Loureiro et al., 2011).